核酸檢測(cè)不僅用于新冠肺炎,,艾滋病檢測(cè)早已在用,!
在這次新冠肺炎疫情中,,核酸檢測(cè)可謂是功不可沒(méi),。那么關(guān)于艾滋病的核酸檢測(cè)你是否了解呢,?由國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)發(fā)布,2019年7月1日開(kāi)始實(shí)施的《艾滋病和艾滋病病毒感染診斷》WS-293-2019,將核酸檢測(cè)納入艾滋病診斷標(biāo)準(zhǔn),。由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心艾防中心組織專家修訂的《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范(2020年版)》中也強(qiáng)化了核酸檢測(cè)的診斷價(jià)值,。今天我們一起來(lái)認(rèn)識(shí)一下艾滋病的核酸檢測(cè)吧!
- 核酸檢測(cè)適用于哪些情況,?有什么意義,?
核酸檢測(cè)常用于HIV感染診斷、血液篩查,、病程評(píng)估及抗病毒治療效果監(jiān)測(cè)等,。
- 對(duì)于篩查試驗(yàn)有反應(yīng)但抗體試驗(yàn)不確定或陰性的樣本,可將核酸檢測(cè),、臨床病史和 CD4+T 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)結(jié)果綜合判斷,。
- 對(duì)于近期有明確流行病學(xué)史的個(gè)體,可通過(guò)核酸檢測(cè)判定是否為急性期感染,。劃重點(diǎn),!核酸檢測(cè)結(jié)果陰性或低于最低檢測(cè)限不能排除HIV-1感染哦!
- 對(duì)于HIV-1感染母親所生小于18個(gè)月齡的嬰兒,,不同時(shí)間的兩次HIV-1核酸檢測(cè)均為陽(yáng)性即可作出診斷,。
- 對(duì)于獻(xiàn)血者及采供血機(jī)構(gòu)的原料血漿進(jìn)行核酸檢測(cè),可及時(shí)發(fā)現(xiàn)窗口期感染,,減少二代傳播,。
- 對(duì)于經(jīng)抗病毒藥物治療后的患者,應(yīng)定期進(jìn)行HIV-1病毒載量檢測(cè),,可幫助判斷是否繼續(xù)使用原定的治療方案以及是否需要更改治療方案,。
- 核酸檢測(cè)常用的方法有哪些?
HIV核酸檢測(cè)主要分為定性和定量試驗(yàn),,均可作為HIV感染診斷試驗(yàn),,不同的方法,檢測(cè)結(jié)果判定和報(bào)告也是不同的,。
- HIV-1核酸定性檢測(cè)
包括RNA檢測(cè)和DNA檢測(cè),。檢測(cè)方法主要有實(shí)時(shí)熒光定量 PCR方法、熒光探針PCR法及以焦磷酸化激活聚合酶(PAP)反應(yīng)為基礎(chǔ)的核酸擴(kuò)增PCR方法,。
檢測(cè)結(jié)果顯示“有反應(yīng)”或“檢測(cè)到”,報(bào)告核酸陽(yáng)性,;檢測(cè)結(jié)果顯示“無(wú)反應(yīng)”或“未檢測(cè)到”,,報(bào)告核酸陰性。核酸定性檢測(cè)陰性不能排除HIV-1感染,,
還需要根據(jù)流行病學(xué)史,、臨床表現(xiàn)和實(shí)驗(yàn)室其他相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行診斷。 - HIV-1核酸定量檢測(cè)
RNA檢測(cè)主要是定量檢測(cè)血漿中的病毒RNA,檢測(cè)的主要原理是實(shí)時(shí)熒光定量PCR,。DNA檢測(cè)包括全血,、干血斑、PBMC及組織中DNA檢測(cè),,同定性檢測(cè)一樣,,DNA含量測(cè)定主要有熒光探針PCR法及以焦磷酸化激活聚合酶(PAP)反應(yīng)為基礎(chǔ)的核酸擴(kuò)增PCR方法。另外近幾年迅速發(fā)展起來(lái)的一種核酸絕對(duì)定量分析技術(shù)——數(shù)字PCR也可用于HIV核酸定量檢測(cè),,雖然2020修訂版的規(guī)范中還沒(méi)有說(shuō)明,,但相信這種技術(shù)在艾滋病領(lǐng)域也會(huì)很快發(fā)展起來(lái)。
對(duì)于檢測(cè)結(jié)果:當(dāng)檢測(cè)值>5000 CPs/ml(或IUs/ml),,報(bào)告檢測(cè)值,;檢測(cè)值≤5000 CPs/ml,再次采樣檢測(cè)后報(bào)告檢測(cè)值,,結(jié)果>5000 CPs/ml可以作為診斷依據(jù),,結(jié)果仍≤5000 CPs/ml,則需結(jié)合流行病學(xué)史,、臨床病史等結(jié)果進(jìn)行綜合判斷,。檢測(cè)值小于檢測(cè)下線,報(bào)告低于檢測(cè)限,。劃重點(diǎn),!對(duì)于暴露前或暴露后預(yù)防用藥的個(gè)體,檢測(cè)值低于最低檢測(cè)限不能排除HIV-1感染,,需要根據(jù)其他相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行綜合判斷,。
- 核酸檢測(cè)應(yīng)該注意什么?
- 對(duì)于專業(yè)人員來(lái)說(shuō),,應(yīng)注意樣本采集,、送檢和保存,HIV核酸檢測(cè)應(yīng)在符合要求的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行,,實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)充分了解并嚴(yán)格遵守各項(xiàng)規(guī)定和掌握操作技能,,所用試劑必須是經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)、在有效期內(nèi)的試劑,,并嚴(yán)格按產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)操作,。同時(shí)要做好質(zhì)量控制,包括從樣本接收到發(fā)出報(bào)告各環(huán)節(jié)的管理過(guò)程,,人員,、實(shí)驗(yàn)室分區(qū)和環(huán)境、儀器和檢測(cè)過(guò)程等,。
- 對(duì)于患者或者高危人員來(lái)說(shuō),,可以到疾控中心進(jìn)行免費(fèi)的核酸檢測(cè),,在核酸檢測(cè)前一天,要注意多休息,,補(bǔ)充維生素,,避免食用油膩食物和飲酒,放松心情,。
核酸檢測(cè)知識(shí)小拓展
美國(guó)CDC在2019年艾滋病診斷大會(huì)上發(fā)表了HIV核酸定量檢測(cè)替代策略的報(bào)告,,提出了“三步法”替代策略和“兩步法”替代策略,研究發(fā)現(xiàn)兩種策略不僅具有良好的檢測(cè)準(zhǔn)確性,,還能有效減少檢測(cè)成本,,及時(shí)排除篩查假反應(yīng)性,縮短檢測(cè)時(shí)間,,同時(shí)能提高HIV-1核酸定量檢測(cè)結(jié)果在臨床工作中的使用價(jià)值,,但這也需要更多的研究數(shù)據(jù)來(lái)證明??傮w來(lái)說(shuō)這種新策略對(duì)于今后艾滋病檢測(cè)工作的完善還是具有指導(dǎo)和借鑒意義的,!
參考文獻(xiàn)
1.《艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標(biāo)準(zhǔn)》中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) WS-
293-2019,中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì),。
2.《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范(2020年版)》,,中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心。
3. CDC reports on two alternative HIV testing algorithms [R]. CAP TODAY. Amy
Carpenter Aquino, 2019.
(病毒及免疫研究室 鄭姍 邢輝)
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